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western原理和步骤？
Western blot（也称为蛋白质免疫印迹）是一种常用于研究中分离和鉴定蛋白质的技术。它利用 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS-PAGE) 来分离指定样品中包含的各种蛋白质，然后将分离的蛋白质转移到硝酸纤维素或 PVDF 膜上，接下来将膜与对感目标蛋白质的特异抗体一起孵育。
操作步骤：
1. 准备样品
1）制冰，准备冰盒。
2）配制细胞裂解液：根据细胞数量确定所需裂解液：50ul/六孔板一孔 。
裂解液配方：100ul碧云天裂解液+1ul蛋白酶抑制剂混合物+1ul PMSF
3）按实验需要准备好细胞：去掉培养基，1×PBS洗3次（去掉培养基中的血清），每个孔（6孔板）加入适量的裂解液。迅速用细胞刮刮下细胞并转移至1.5ml管中，置于冰上20min，振荡混合后，再置冰上10min。
4）12，000g，4℃离心15min，收集上清至另一1.5ml管。
k12含量检测方法？
K12是一种高抗原性蛋白质，通过对其含量进行检测可以为研究和诊断相关疾病提供帮助。常用的K12含量检测方法包括酶联免疫吸附实验（ELISA）和免疫印迹（Western Blot）。
1. 酶联免疫吸附实验（ELISA）
ELISA是一种基于抗体与特定分子结合的技术，可以快速、准确、灵敏地确定蛋白质的含量。具体操作流程如下：
- 准备样品：收集需要分析的样品，并按照标准程序处理。
- 准备试剂：制备相应的抗体和检测物，并配置洗涤缓冲液、显色底物和停止液等试剂。
- 固定抗原：将目标蛋白质固定在微孔板上。
- 加入样品：向微孔板中加入已处理好的样品和质量控制样本。
- 加入抗体：加入与目标蛋白质特异性结合的酶标记抗体，并搅拌混匀。
- 洗涤：用洗涤缓冲液清洗孔板以去除非特异性的绑定物。
- 加入显色底物：加入显色底物并孵育一定时间，产生颜色反应。
- 停止反应：加入停止液以终止底物反应，测定吸光度。
2. 免疫印迹（Western Blot）
Western Blot技术可以对样品中的特定蛋白质进行识别和分离。这种方法需要熟练的实验操作和较长的操作时间，但可以提供更高的灵敏度和特异性。具体操作流程如下：
- 准备样品：收集需要分析的样品，并按照标准程序处理。
- SDS-PAGE电泳：将样品注入凝胶电泳板中进行分离。
- 蛋白转移：将凝胶中的蛋白质转移到聚丙烯酰胺(PVDF)或硝酸纤维素(NC)薄膜上。
- 阻断非特异性结合：将PVDF或NC薄膜浸泡在含有牛血清蛋白或其他非特异性抗体的缓冲液中阻断非特异性结合。
- 加入一抗：向PVDF或NC薄膜上添加与目标蛋白质结合的一抗，即特异性抗体。
- 加入二抗：加入与一抗结合的酶标记二抗，再搅拌混匀。
- 显色：加入显色底物并孵育一定时间，产生颜色反应。
- 停止反应：加入停止液以终止底物反应。
以上两种方法均可用于K12含量检测，具体选择哪种方法需要根据实际情况和需求进行优化和选择。
hpce是什么色谱法？
毛细管电泳（capillary electrophoresis，CE）又称高效毛细管电泳（high performance capillary electrophoresis，HPCE），是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。毛细管电泳实际上包含电泳、色谱及其交叉内容，它使分析化学得以从微升水平进入纳升水平，并使单细胞分析，乃至单分子分析成为可能。长期困扰我们的生物大分子如蛋白质的分离分析也因此有了新的转机。
凝胶色谱法和电泳的区别是什么？都可以测DNA吗？
凝胶色谱法用来分离和提纯蛋白质和
SDS凝胶电泳法主要是检验蛋白质的纯度
意思是你先用凝胶色谱法提取蛋白质，然后可以用SDS凝胶电泳法来检验提取的蛋白质的纯度。凝胶色谱法分离蛋白质的原理：由于蛋白质的形状、大小、吸附性质、亲和力等性质都有差别，所以不同分子量的蛋白质通过多孔凝胶颗粒的间隙的流动速度不同、路程长短也不同;分子量大的分子通过多孔凝胶颗粒的间隙的路程短，流动快;分子量小的分子穿过多孔凝胶颗粒内部的路程长，流动慢。
什么是电泳现象？
胶粒在外加电场作用下，能在分解剂里向阳极或阴极作定向移动，这种现象叫电泳。
说明：
（1）电泳现象表明胶粒带电荷，但胶体都是电中性的。
（2）一般来说，金属氢氧化物、金属氧化物的胶体微粒吸附阳离子，带正电荷，如Fe(OH)3胶体和Al(OH)3胶体微粒。非金属氧化物、金属硫化物胶体微粒吸附阴离子，带负电荷，如As2S3胶体、H2SiO3胶体的微粒。当然，胶体中胶粒带电的电荷种类可能与其他因素有关。
（3）同种胶体的胶粒带相同的电荷。
（4）固溶胶不发生电泳现象。凡是胶粒带电荷的液溶胶，通常都可发生电泳现象。气溶胶在高压电的条件也能发生电泳现象。
电泳——在外加电场的作用下，胶体的微粒在分散剂里向阴极（或阳极）作定向移动的现象。原因：胶粒带有电荷（胶粒表面积很大，吸附能力很强，能选择性地吸附溶液中的离子而带有电荷）。